【摘 要】
:
目的 构建并鉴定含有APC蛋白不同功能区域的真核细胞表达载体pEGFP-N3-APC1~5,转染人类结直肠癌细胞HCT-116,观察重组质粒在细胞内的表达.方法 根据APC基因的功能结构以及APC
【机 构】
:
中南人学湘雅二医院消化内科,广州军区广州总医院医学实验科
论文部分内容阅读
目的 构建并鉴定含有APC蛋白不同功能区域的真核细胞表达载体pEGFP-N3-APC1~5,转染人类结直肠癌细胞HCT-116,观察重组质粒在细胞内的表达.方法 根据APC基因的功能结构以及APC突变簇集区的特点,设计特异性引物扩增APC基因特异性的功能区域片段.将扩增出的5个APC片段克隆到pEGFP-N3载体的N端,经测序分析对重组质粒pEGFP-N3-APC1~5进行鉴定.使用脂质体转染法将重组质粒转染人类结直肠癌细胞HCT-116,通过观察细胞中绿色荧光蛋白的表达情况来检测APC功能区域在细胞内的表达.以RT-PCR法进一步验证重组质粒在细胞中的表达.结果 构建5个pEGFP-N3-APC结构区域的重组真核表达载体,重组真核表达载体转染HCT-116细胞后,细胞中均可见绿色荧光蛋白的表达.RT-PCR结果显示,5个蕈组质粒在HCT-116细胞中均可表达.结论 真核细胞表达载体pEGFP-N3-APC1~5的成功构建,为进一步研究其在细胞内的功能,筛选结直肠癌基因治疗的有效且易于基因操作的靶标片段提供了基础.
其他文献
目前,病毒已成为困扰计算机系统安全和网络发展的重要问题.本文作者用长期大量的查杀计算机病毒的实践经验和心得体会,通过对计算机病毒的特征类型、检测方法的基本介绍,使读
1999年由美国的Zhao和Drliea首先提出了防耐药突变浓度(MPC)和耐药突变选择窗(MSW)的假说.该假说认为每一种抗菌药物的浓度如果位于MSW内,那么细菌只需要一步突变而产生耐药,
在教学实践中,注重情感培养的教学活动,对培养学生的学习兴趣,提高课堂教学效果,全面发展学生素质,可以起到意想不到的作用。因此,创设和谐、愉悦、充满求知激情的课堂教学是
低温肉制品越来越受到消费者的青睐.本文介绍了低温肉制品的腐败变质机理,以及目前国内外常用的保鲜技术措施,如真空包装,二次杀菌,辐照,添加剂,脱氧剂.开发安全高效的低温肉
通过对防水设防中节点部位的设防条件分析,提出需设置增强层的部位、材料选用和设计施工方法.
本文试图通过对我国旅行社行业现行特征和经营体系的系统分析,提出我国旅行社行业经营体系调整的目标模式,以期为其有效的迎接挑战和参与国际竞争提供参考.
肝移植患者术前因长期输液治疗、支持治疗和经常性抽血检查,外周静脉血管损坏严重,移植术后也因病情需要化疗或胃肠外营养支持(total parenteral nutrition,TPN),外周血管难
随着煤矿自动化水平的提高,监视系统和集中控制技术的日益完善,煤矿选煤厂大都安装了集中控制系统,该文从实际出发研究了煤矿选煤厂控制系统在煤矿生产中中所起到的作用,分析
肝干细胞具有自我更新、增生及分化为肝细胞和胆管细胞的能力.肝干细胞的研究是当今肝病研究领域的热点之一.随着肝干细胞研究的深入,必将为肝病的治疗提供新的策略.本文就肝
奥马珠单抗是重组化、人源化抗IgE单克隆抗体,可选择性与高亲和力IgE受体结合,降低血浆中游离的IgE水平,从而抑制由IgE引起的一系列生物学效应.同时还对嗜碱粒细胞、肥大细胞