【摘 要】
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目的应用声带细胞外基质干预（胶原酶和透明质酸注射）和人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells,hAEC）在声带瘢痕内的移植,探索其对声带瘢痕修复再生的意义.方法对20只新西兰兔中的38侧声带行声带锐性损伤,形成声带瘢痕.分离培养实验用hAEC,慢病毒绿色荧光蛋白基因转染作标记.将hAEC移植入10侧瘢痕声带,即hAEC移植组;声带细胞外基质干预（注射胶原酶和透
【机 构】
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复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科,上海200031,复旦大学附属眼耳鼻喉科医院耳鼻咽喉科,上海200031,上海交通大学附属国际和平妇幼保健院中心实验室,复旦大学附属中山医院病理科,复旦大学附属眼
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目的应用声带细胞外基质干预（胶原酶和透明质酸注射）和人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells,hAEC）在声带瘢痕内的移植,探索其对声带瘢痕修复再生的意义.
方法对20只新西兰兔中的38侧声带行声带锐性损伤,形成声带瘢痕.分离培养实验用hAEC,慢病毒绿色荧光蛋白基因转染作标记.将hAEC移植入10侧瘢痕声带,即hAEC移植组;声带细胞外基质干预（注射胶原酶和透明质酸）10侧瘢痕声带,即基质干预组;hAEC移植同时细胞外基质干预10侧瘢痕声带,即复合组;瘢痕未处理8侧声带,即瘢痕组.2侧正常声带作为对照组.术后1和2个月时示踪观察hAEC在声带内的生长、分布及活性情况;术后1、2、3和6个月采用HE染色、Masson染色及免疫组织化学观察声带形态学变化及声带固有层胶原、纤维连接蛋白的分布及含量变化.
结果hAEC原代培养4d后呈铺路石样生长,移植入瘢痕声带后可在固有层内持续存活2个月;术后1个月和2个月免疫荧光显示角蛋白（上皮细胞标志性蛋白）荧光阳性.术后6个月光镜下观察及Masson染色半定量分析示瘢痕组较正常组胶原量明显增加,排列紊乱;hAEC移植组、基质干预组及复合组胶原量和排列较瘢痕组改善,hAEC移植组、基质干预组二者相似,复合组优于前两组,但尚未及正常;免疫组织化学半定量分析示瘢痕组较正常组纤维连接蛋白平均光密度明显增加,hAEC移植组、基质干预组及复合组的平均光密度介于瘢痕组和正常对照组之间,hAEC移植组与基质干预组相差不明显,复合组优于前两组.
结论声带细胞外基质干预和hAEC注射移植复合作用于兔瘢痕声带后,可更好地促进声带细胞外基质的分泌、合理分布及部分有序化排列,促进声带瘢痕修复再生.
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