【摘 要】
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目的制备白念珠菌烯醇化酶N端基因重组肽段ENO1-319P并检测其抗原性。方法选择与人烯醇化酶蛋白α-ENO同源性低的白念珠菌烯醇化酶肽段ENO1-319P,将其编码DNA序列克隆到表达
【机 构】
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南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所
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目的制备白念珠菌烯醇化酶N端基因重组肽段ENO1-319P并检测其抗原性。方法选择与人烯醇化酶蛋白α-ENO同源性低的白念珠菌烯醇化酶肽段ENO1-319P,将其编码DNA序列克隆到表达载体pET28a(+),并在大肠埃希菌BL21(DE3)中用IPTG诱导带有His标签的重组肽段的表达。用SDS-PAGE电泳分析,TALON金属亲和层析柱纯化重组蛋白,其抗原性用侵袭性白念珠菌感染(ICAI)患者血清进行western blot评估。结果成功表达并纯化了目的肽段,该蛋白可与ICAI患者血清发生特异性反应。
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