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【目的】建立能同时检测沙门氏菌、大肠杆菌0157:H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR,为水产品质量安全检测工作提供技术支持。【方法】以LB肉汤培养基为共增菌培养基,根据沙门氏菌invA基因、大肠杆菌0157:H7册E基因、志贺氏菌ipaH基因和金黄色葡萄球菌femA基因的保守序列设计引物,对引物浓度配比、退火温度及反应体系等进行优化,并对建立的多重PCR进行特异性、敏感性及临床样品检验试验。【结果】4种目标致病菌在LB肉汤培养基中36℃培养18h后,均表现出良好的生长趋势,增菌数量级均在10。CF