【摘 要】
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目的通过结核分支杆菌 Ag85B蛋白编码基因在大肠杆菌中稳定表达,以获得大量纯化的 Ag85B蛋白.方法采用 DNA重组技术构建结核分支杆菌 Ag85B基因的表达载体,双酶切和聚合酶链
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目的通过结核分支杆菌 Ag85B蛋白编码基因在大肠杆菌中稳定表达,以获得大量纯化的 Ag85B蛋白.方法采用 DNA重组技术构建结核分支杆菌 Ag85B基因的表达载体,双酶切和聚合酶链反应( PCR)鉴定重组子,阳性重组子转化大肠杆菌,并诱导表达外源蛋白.十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS PAGE)鉴定 Ag85B蛋白抗原在大肠杆菌中的表达,对染色的凝胶扫描,以测定目的蛋白表达水平.结果菌体蛋白经 SDS PAGE,含阳性重组质粒的菌体蛋白中出现一条新蛋白带,表达量占菌体总蛋白的 33%～ 38
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