酵母双杂交筛选白细胞中新基因NS3TP6结合蛋白基因

来源 :世界华人消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：czh19890220

【摘要】

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目的：用酵母双杂交技术筛选白细胞中与丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)反式调节靶基因编码产物NS3TP6蛋白结合蛋白的基因方法：用多聚酶链反应(PCR)法扩增HCVNS3TP6蛋白基因，

【作者】

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邵清成军白雪帆王琳张健卢成哲梁辉东刘敏李强

【机构】

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中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室,中国人民解放军第四军医大学唐都医院传染科,中国人民解放军解放军第206医院CT室

【出处】

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世界华人消化杂志

【发表日期】

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2004年7期

【关键词】

：

酵母双杂交筛选白细胞新基因 NS3TP6结合蛋白基因丙型肝炎病毒

【基金项目】

：

国家自然科学基金攻关项目,No.C03011402,No．C30070689军队“九、五”科技攻关项目,No．98D063军队回国留学人员启动基金项目,No．98H038军队“十、五”科技攻关青年基金项目,No．01Q138军队“十、五”科技攻关面上项目,No．01MB135

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目的：用酵母双杂交技术筛选白细胞中与丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)反式调节靶基因编码产物NS3TP6蛋白结合蛋白的基因方法：用多聚酶链反应(PCR)法扩增HCVNS3TP6蛋白基因，连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒，转化酵母细胞AH109并在其内表达，然后与转化了人白细胞文库质粒的酵母细胞Y187进行配合，在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落，增菌后提取质粒，转化入大肠杆菌，提取质粒并测序，进行生物信息学分析．结果：成功克隆出HCV NS3TP6蛋白基因并在酵母细胞中表达，

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