【摘 要】
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目的 探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响.方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L-1 24 h,连续24周,分别于染毒3,6,
【机 构】
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深圳市疾病预防控制中心现代毒理学重点实验室卫生毒理医学重点实验室,深圳市慢性病防治院
【基金项目】
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深圳市科技计划项目;深圳市科技研发资金基础研究计划项目;国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金
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目的 探讨低剂量甲醛长期染毒对永生化人支气管上皮细胞16HBE癌症相关基因启动子区甲基化水平的影响.方法 16HBE细胞每周染毒甲醛10μmol·L-1 24 h,连续24周,分别于染毒3,6,9,12,15,18,21和24周提取RNA或DNA,应用DNA甲基化相关酶消化结合荧光定量PCR的方法观察24个癌症相关基因启动子区甲基化水平的变化；应用荧光定量PCR的方法观察染毒对亚甲基四氢叶酸还原酶基因(MTHFR)和成对盒基因(PAX5)基因表达的时间-效应关系.结果 与正常对照组16HBE细胞相比,甲醛染毒细胞4个基因甲基化水平显著改变,2个基因甲基化程度升高,2个基因甲基化程度降低；而在阳性对照人非小细胞癌上皮细胞A549细胞中有9个基因甲基化水平发生显著变化,其中3个基因甲基化水平升高,6个基因甲基化水平降低；甲醛染毒16HBE细胞和A549细胞MTHFR基因均发生高甲基化改变,PAX5基因均出现低甲基化改变.与正常对照组相比,甲醛染毒24周的细胞中,MTHFR基因启动子区甲基化水平升高,非甲基化DNA含量降低58.2％,而PAX5基因启动子区甲基化水平降低,非甲基化DNA含量升高27.1％；随着甲醛染毒时间延长,MTHFR基因表达逐渐降低,而PAX5基因表达逐渐升高.结论 低剂量甲醛长期染毒可以使MTHFR基因和PAX5基因启动子区甲基化水平异常,进而引起基因表达水平改变.
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