增强型绿色荧光蛋白真核表达载体的构建和表达

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目的构建增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein, EGFP)编码基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-GFP,并观察其在Hep-2细胞中的表达情况. 方法据已知的EGFP基因序列,设计合成1对引物,并引入Hind Ⅲ和EcoR Ⅴ酶切位点.应用PCR技术,从含有EGFP的pAdTrack-CMV中扩增EGFP编码基因.通过TA连接将其克隆入pGEM-T easy载体,经PCR及限制性内切酶鉴定后,插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,转化Esche
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