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目的通过克隆EV71病毒结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的重组杆状病毒表达载体。方法设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物,克隆至含有CMV启动子的杆状病毒穿梭载体pFastBacDual—CMV上,命名为pFBCMV—IRES。从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经RT—PCR技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,定向克隆至杆状病毒穿梭载体pF-BCMV—IRES的IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠杆菌DI-15a中,经PC