【摘 要】
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建立将牛免疫球蛋白G (bovine immunoglobulin G,bIgG)糖链末端N-羟乙酰神经氨酸酶切并连接人源N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)的方法,在实现bIgG转化为人源IgG (human IgG,hIgG)的基础上,研究hIgG可结晶(Fc)片段的制备.结果 表明:以170 U/mL神经氨酸酶酶切bIgG (4.0 mg/mL)后,通过β-1,4-半乳糖基转移酶和α-2,6-唾液酸转移酶分别转移半乳糖(galactose,Gal)和Neu
【机 构】
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南京农业大学食品科学技术学院,江苏南京 210095;南京农业大学食品科学技术学院,江苏南京 210095;安徽科技学院食品工程学院,安徽凤阳 233100
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建立将牛免疫球蛋白G (bovine immunoglobulin G,bIgG)糖链末端N-羟乙酰神经氨酸酶切并连接人源N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)的方法,在实现bIgG转化为人源IgG (human IgG,hIgG)的基础上,研究hIgG可结晶(Fc)片段的制备.结果 表明:以170 U/mL神经氨酸酶酶切bIgG (4.0 mg/mL)后,通过β-1,4-半乳糖基转移酶和α-2,6-唾液酸转移酶分别转移半乳糖(galactose,Gal)和Neu5Ac残基,可制备增加8.4个Gal残基和42个Neu5Ac残基的hIgG分子.此外,在10.0 mg/mL hIgG、m(木瓜蛋白酶)∶m (hIgG) =0.05、10.0 mmol/L半胱氨酸激活剂、2.0 mmol/L EDTA溶液、pH 7.0条件下,酶解3h可制得hIgG的较高纯度Fc片段,最终hIgG得率为71.7％,Fc片段得率为20.8％.本研究为bIgG的产品开发和营养价值评价提供科学依据.
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