朝鲜碱茅甜菜碱醛脱氢酶cDNA5'末端序列的克隆及植物表达载体的构建

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采用改良的RT-PCR及5′RACE法,成功地克隆了朝鲜碱茅甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因cDNA 5′端序列,与已知序列拼接,获得了BADHcDNA全长1781bp,包含一个完整的开放阅读框(ORF),编码506个氨基酸。其含有醛脱氢酶高度保守序列VT/SLELGGKSP,及其后29位与酶功能有关的Cys。多序列比对和系统进化分析表明,朝鲜碱茅BADH与大麦BBD1同源性最高,并构建了PBI121-BADH植物表达载体。 The 5’-end cDNA of BADH gene was cloned successfully by modified RT-PCR and 5’RACE method. The full length of BADH cDNA was 1781bp, including one The complete open reading frame (ORF), encoding 506 amino acids. It contains a highly conserved aldehyde dehydrogenase sequence VT / SLELGGKSP, followed by 29 enzyme-related Cys. Multiple sequence alignments and phylogenetic analysis indicated that BADH of P. thaliana had the highest homology with BBD1 of barley, and PBI121-BADH plant expression vector was constructed.
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