【摘 要】
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旨在研究视神经蛋白(neuropsin,OPN5)对鸭颗粒细胞凋亡、增殖及类固醇激素生成的影响.本研究分别对鸭颗粒细胞进行OPN5过表达质粒和OPN5 siRNA处理72 h(n=6),应用EdU细胞增殖检测技术、流式细胞技术、Annexin V-FITC、RT-PCR、Western blot及ELISA技术系统地检测颗粒细胞的增殖、凋亡情况及生殖相关基因的mRNA、蛋白水平及激素水平的变化规律.结果 显示,OPN5过表达能促进鸭卵泡颗粒细胞增殖,抑制鸭卵泡颗粒细胞凋亡;能极显著地促进GnRHR、FSH
【机 构】
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仲恺农业工程学院,广州510225;广东省水禽健康养殖重点实验室,广州510225
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旨在研究视神经蛋白(neuropsin,OPN5)对鸭颗粒细胞凋亡、增殖及类固醇激素生成的影响.本研究分别对鸭颗粒细胞进行OPN5过表达质粒和OPN5 siRNA处理72 h(n=6),应用EdU细胞增殖检测技术、流式细胞技术、Annexin V-FITC、RT-PCR、Western blot及ELISA技术系统地检测颗粒细胞的增殖、凋亡情况及生殖相关基因的mRNA、蛋白水平及激素水平的变化规律.结果 显示,OPN5过表达能促进鸭卵泡颗粒细胞增殖,抑制鸭卵泡颗粒细胞凋亡;能极显著地促进GnRHR、FSHR、LHR的表达,并抑制GnIH、GnIHR的表达(P＜0.01);能显著或极显著上调StAR、CYP11A1、3β-HSD、CYP17A1、CYP19A1的mRNA水平(P＜0.05或P＜0.01);显著升高OPN5、3β-HSD及CYP19A1的蛋白表达水平(P＜0.05)和极显著升高E2、P4分泌水平(P＜0.01),并极显著降低INHβ的水平(P＜0.01).OPN5 siRNA能够显著降低OPN5的表达水平(P＜0.01),抑制卵泡颗粒细胞增殖并促进凋亡,极显著下调GnRH、GnRHR、FSHR、LHR(P＜0.01),促进GnIH、GnIHR的表达(P＜0.01);并极显著抑制StAR、CYP11A1、CYP17A1的表达(P＜0.01);显著降低OPN5、3β-HSD及CYP19A1蛋白表达水平(P＜0.05)及极显著降低E2、P4的分泌水平(P＜0.01),并能极显著升高INHβ的水平(P＜0.01).研究表明,OPN5能促进鸭卵泡颗粒细胞的增殖,抑制其凋亡,促进颗粒细胞中类固醇激素的生成和分泌.
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