白藜芦醇预处理对星形胶质细胞氧糖剥夺/再复氧损伤后活化及炎症反应的影响

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目的探讨白藜芦醇预处理对体外氧糖剥夺/再复氧(OGD/R)损伤后星形胶质细胞活化及炎症反应的影响。方法征集20只新生SD大鼠(生后24 h内),将其原代分离培养的大脑皮层星形胶质细胞行氧糖剥夺150 min,再复氧培养24 h。实验分为正常组(Nor)、对照组(Ctrl)和白藜芦醇预处理组(Res)。CCK-8法检测细胞活力,5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)法检测细胞增殖,免疫荧光染色法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、S100β蛋白表达,Western blotting检测GFAP、S100β、波形蛋白(vimentin)、白细胞介素(IL)-10、β干扰素(IFN-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β蛋白表达,ELISA法检测IL-10、IFN-β、TNF-α和IL-1β蛋白含量。结果 CCK-8法检测结果显示,随着白藜芦醇浓度(5、20、40μmol/L)的增高,细胞活力逐渐增高,且与对照组差异有显著性(P<0. 01),以40μmol/L组细胞活力最强。之后随白藜芦醇浓度(80、100μmol/L)的增高,细胞活力显著降低,以100μmol/L组细胞活力最弱(P<0. 05)。Ed U检测显示,在OGD/R损伤后,对照组和白藜芦醇组显著高于正常组Ed U阳性细胞比例(P<0. 01),而白藜芦醇组显著低于对照组(P<0. 01)。免疫荧光染色、Western blotting和ELISA法显示,对照组和白藜芦醇组GFAP、S100β、vimentin、IL-10、IFN-β、TNF-α和IL-1β蛋白表达或含量显著高于正常组(P<0. 05),但白藜芦醇组除IL-10和IFN-β蛋白表达或含量较对照组增高外,其余均低于对照组(P<0. 05)。结论白藜芦醇预处理可抑制OGD/R后体外星形胶质细胞的活化,并减轻炎症反应。
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