【摘 要】
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针对SARS冠状病毒的分子生物学检测是控制SARS流行的关键环节.为评价全基因组扩增对SARS微量样本检测的影响,采用6-mer随机引物反转录,用加接头的随机引物合成第二链,再以接
【机 构】
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本元正阳基因技术股份有限公司,本元正阳基因技术股份有限公司,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制研究所病毒基因工程国家重点实验室
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针对SARS冠状病毒的分子生物学检测是控制SARS流行的关键环节.为评价全基因组扩增对SARS微量样本检测的影响,采用6-mer随机引物反转录,用加接头的随机引物合成第二链,再以接头序列为引物扩增并掺入荧光标记,最后与带有70-mer探针的基因芯片杂交.此非特异方法基本覆盖了样本中的全部DNA,结果发现SARS冠状病毒全基因组的扩增效果对基因芯片杂交结果的均匀性有较大影响,PCR循环次数增多会导致扩增均匀性的降低.分析了不同的引物对全基因组扩增均匀性的影响,探讨了全基因组扩增策略的缺陷.
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