【摘 要】
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为了建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR方法,测定TaAGL7-N基因在小麦不同器官的表达水平。采用RT-PCR扩增小麦TaAGL7-N基因片段,建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线,以1
【机 构】
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西北农林科技大学农学院,西北农林科技大学植物保护学院
【基金项目】
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西北农林科技大学大型仪器设备新功能开发项目(dysb090208);国家自然科学基金(31000707);西北农林科技大学基本科学业务费专项资金(QN2011087)
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为了建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR方法,测定TaAGL7-N基因在小麦不同器官的表达水平。采用RT-PCR扩增小麦TaAGL7-N基因片段,建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线,以18SrRNA为内参,检测小麦不同器官中的TaAGL7-N表达水平。结果表明,标准曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系,熔解曲线分别在82.8～83.6℃和83.1～85.6℃各仅有一个单峰。成功建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR法,该方法具有特异度和敏感度高、稳定性好的特点,可用于定量测定小麦中TaAGL7-N的表达水平。
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