【摘 要】
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本研究旨在探讨嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胁迫下MHCⅠ基因在东北林蛙不同组织的表达特征,为揭示两栖类抗感染免疫应答机制提供依据.文中首先构建嗜水气单胞菌感
【机 构】
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哈尔滨师范大学生命科学与技术学院,黑龙江哈尔滨 150025
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本研究旨在探讨嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胁迫下MHCⅠ基因在东北林蛙不同组织的表达特征,为揭示两栖类抗感染免疫应答机制提供依据.文中首先构建嗜水气单胞菌感染下的试验动物模型,通过苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE染色)观察病理学变化;利用RT-PCR克隆东北林蛙MHCⅠ基因α1+α2肽结合区并进行生物信息学分析,再运用荧光定量PCR技术检测Ah胁迫下MHCⅠ在不同组织中的转录水平.结果 表明:在Ah感染后,皮肤、肝脏和肌肉等组织均出现细胞结构消失和纹理紊乱等现象;获得MHCⅠ基因α1+α2肽结合区片段494 bp,可编码164个氨基酸,与两栖类同源性在77％以上,与哺乳类同源性低至14.96％,表明MHCⅠ基因α1+α2区在不同物种间保守性较低;荧光定量PCR结果显示,在Ah胁迫下,实验组肝脏、脾脏、肾脏、皮肤和肌肉组织MHC Ⅰ基因的转录水平在72 h前均高于对照组,但是各组织到达峰值的时间具有差异性(P＜0.01),表明Ah胁迫下MHCⅠ基因在不同组织的表达时间存在差异.研究结果为进一步探究MHC分子在抗感染中的免疫功能提供了参考依据.
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