【摘 要】
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目的:优化并获得重组尿酸氧化酶(rUOX)基因工程大肠杆菌BL21( DE3 )/pET-32a-uox高密度发酵的工艺参数.方法:在三角摇瓶中进行培养条件的优化实验,分别考察了pH值、接种量、
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病研究所,军事医学科学院生物工程研究所
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目的:优化并获得重组尿酸氧化酶(rUOX)基因工程大肠杆菌BL21( DE3 )/pET-32a-uox高密度发酵的工艺参数.方法:在三角摇瓶中进行培养条件的优化实验,分别考察了pH值、接种量、无机盐、碳源、诱导强度等对工程菌生长和重组蛋白表达的影响,得到了优化的发酵条件；在此基础上放大至NBS BIOFL0 110 14 L发酵罐,通过对诱导时机的优化,利用分批补料发酵的方武,使rUOX在高密度培养的条件下得到高表达.结果:在优化的发酵条件下,菌体密度(D600mm)最终达到50以上,相当于20 g/L干重；可溶性rUOX占菌体总蛋白量的45％,其含量达到3.45 g/L.结论:为规模化制备重组黄曲霉尿酸氧化酶奠定了基础.
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