【摘 要】
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目的采用两种筛选标记法（HIS-LEU-ARG基因敲除策略和URA-Blaster法）分别构建白念珠菌RAS1基因敲除株,并对两种方法的成功率进行比较。方法 HIS-LEU-ARG基因敲除策略中,以SN152
【机 构】
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南京医科大学口腔疾病研究江苏省重点实验室南京医科大学附属口腔医院牙体牙髓科
【基金项目】
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国家自然科学基金(81271151;81371156);江苏高校优势学科建设工程资助项目(2014-37)
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目的采用两种筛选标记法（HIS-LEU-ARG基因敲除策略和URA-Blaster法）分别构建白念珠菌RAS1基因敲除株,并对两种方法的成功率进行比较。方法 HIS-LEU-ARG基因敲除策略中,以SN152菌株基因组DNA、筛选标记DNA为模板,采用融合PCR技术构建融合基因片段。URA-Blaster法中,以CAI4基因组DNA、hisG-URA3-hisG基因敲除盒为模板,运用无缝克隆技术构建RAS1基因敲除质粒。随后,分别将上述两种方法得到的融合基因片段和质粒线性化产物转染至白念珠菌SN152、C
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