【摘 要】
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目的探讨极光激酶抑制剂Danusertib(Danu)对肝癌HepG2细胞株增殖、细胞周期、凋亡和自噬的影响及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Danu对各组细胞的增殖抑制率
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目的探讨极光激酶抑制剂Danusertib(Danu)对肝癌HepG2细胞株增殖、细胞周期、凋亡和自噬的影响及其作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Danu对各组细胞的增殖抑制率,确定Danu的半数抑制浓度(IC50)。采用流式细胞仪检测Danu对HepG2细胞周期阻滞、凋亡及自噬的影响。采用Western blot检测细胞周期阻滞、凋亡及自噬相关效应蛋白和通路蛋白的表达。采用氯喹抑制自噬以明确其所起作用。结果 Danu能有效抑制HepG2细胞增殖,24 h和48 h的IC50分别为39.4μmol和14.4μmol。Danu通过上调p53及p21的表达和下调Cyclin B1及CDC2的表达引起HepG2细胞出现G2/M周期阻滞和异倍体,通过上调Bax、Puma、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、cleaved PARP及细胞色素C的表达和下调Bcl-xl及Bcl-2的表达引起HepG2细胞凋亡,通过激活上调AMPK信号通路和和抑制PI3K/PTEN/AKT/mTOR信号轴引起HepG2细胞出现自噬。采用氯喹抑制自噬后,能够增强Danu对HepG2细胞的促凋亡作用。结论 Danu能够有效抑制肝癌HepG2细胞增殖,引起G2/M细胞周期阻滞,导致细胞凋亡,具有良好的体外抗肿瘤效果。Danu能够引起细胞保护性自噬。
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