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目的:建立了一种单台PCR、单次PCR扩增、一次性检测猪瘟、蓝耳、圆环、伪狂犬病毒四种病原的方法。方法:设计合成4套引物,通过反应条件的优化,在建立各病毒单项PCR技术的基础上,建立了一种单台PCR、单次PCR扩增、一次性检测猪瘟、蓝耳、圆环、伪狂犬病毒四种病原的方法,高效诊断疑似猪的脾、肺、淋巴结中是否含有猪瘟、蓝耳、圆环、伪狂犬四种病毒核酸。结果:该方法可快速灵敏检测出疑似猪的脾、肺、淋巴结中是否含有猪瘟、蓝耳、圆环、伪狂犬三种病毒核酸,并具有较好的特异性和重复性。结论:建立了一种猪瘟、蓝耳、圆环、伪狂犬病毒PCR快速诊断方法。