【摘 要】
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目的 研究透明质酸(HA)修饰的聚合物纳米粒共递送佐剂和抗原对小鼠骨髓树突状细胞(BMDCs)的成熟与活化效应.方法 以HA修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)及阳离子脂质DOTAP为
【机 构】
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中国医学科学院 北京协和医学院生物医学工程研究所, 天津,300192
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目的 研究透明质酸(HA)修饰的聚合物纳米粒共递送佐剂和抗原对小鼠骨髓树突状细胞(BMDCs)的成熟与活化效应.方法 以HA修饰的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)及阳离子脂质DOTAP为纳米载体(DOTAP-PLGA)共递送佐剂CpG与模型抗原卵清蛋白(OVA),其中CpG共价结合到纳米粒表面的HA上,OVA物理共混于DOTAP-PLGA纳米载体中.采用透射电子显微镜和动态光散射表征纳米粒;考察纳米粒中CpG和OVA的体外释放情况;利用流式细胞术和激光扫描共聚焦显微镜研究纳米粒在小鼠BMDCs中的摄取和分布;利用流式细胞术和酶联免疫吸附实验分别评价小鼠BMDCs的成熟和细胞因子的表达.结果 制备了共负载CpG和OVA的纳米粒CpG-HA-OVA-PLGA,平均粒径为(305.1±2.2)nm,多分散系数为0.203,透射电子显微镜可观察到经HA修饰的纳米粒有明显的核-壳结构.细胞实验结果表明,CpG-HA-OVA-PLGA纳米粒可被小鼠BMDCs有效摄取并促进CpG的溶酶体释放和抗原OVA的胞质递送;与游离OVA组和游离OVA+CpG组相比,CpG-HA-OVA-PLGA纳米粒组可显著提高BMDCs的共刺激分子CD86和CD40(均P<0.01)、主要组织相容性复合物I以及细胞因子肿瘤坏死因子-α(均P<0.001)的表达.结论 HA修饰的CpG和OVA的纳米粒共递送载体能有效促进树突状细胞的成熟与活化,为研制新型疫苗载体共递送抗原和佐剂提供了依据.
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