论文部分内容阅读
为获得重组蝎昆虫毒素Bm K IT，通过PCR方法在BmK I T基因的3’端融合了编码6个组氨酸残基的核苷酸序列，将其插入原核表达载体pTWINl的内含肽Ssp DnaB Intein基因下游的多克隆位点（MCS）。将获得的表达质粒转化大肠杆菌B1221（DE3）中，用IPTG诱导融合蛋白表达。用Ni—NTA亲和层析柱从茵体裂解液中纯化了CBD—Intein—Bm K IThis6融合蛋白，并在柱上诱导Intein自剪切，成功去除融合子CBD—Intein。通过Superdex75凝胶过滤层析获得了纯度