人整合素αvβ3在CHO细胞表达的研究

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:st841004
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目的使人整合素αvβ3在CHO细胞表面有效表达,为从分子水平了解汉坦病毒(hantavirus, HV)的感染及致病机制. 方法构建含人整合素β3 ORF区基因的真核表达载体pcDNA3.1-β3;将其与含人整合素αv全长cDNA的质粒pcDNA3-αv分别及共转染至CHO细胞中进行表达;采用间接免疫荧光法、流式细胞仪、免疫沉淀及免疫印迹实验对外源基因的表达进行定性、定位及定量检测,并确证表达产物的免疫反应性. 结果人整合素αv、β3基因在共转染组细胞中有高效表达,目的蛋白主要定位于细胞膜上;β3基因在pcDNA3.1-β3单独转染组细胞中的表达明显弱于共转染组;而pcDNA3-αv单独转染组则未见有效的表达. 结论人整合素αvβ3在CHO细胞表面的有效表达需要2个亚基共同参与.

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