STTM技术沉默马铃薯Stu-miR156对其侧根发育的影响

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为了阐明Stu-miR156在马铃薯侧根发育中的生物学功能,以马铃薯栽培品种'Desiree'为试验材料,利用短串联靶标模拟物(Short tandem target mimic,STTM)技术,成功构建了Stu-miR 156沉默表达载体,通过农杆菌介导法转化马铃薯获得了转化植株,qRT-PCR技术检测Stu-miR156及其靶基因StSPL9在转基因植株中的表达量.并通过构建pCAM-GFP-StSPL9融合蛋白表达载体转化烟草,发现靶基因StSPL9位于细胞质和细胞核中.qRT-PCR分析结果表明:在马铃薯转基因株系L1和L2中,Stu-miR156表达量受到严重抑制,在根、茎和叶中均不同程度地下调,其靶基因StSPL9均上调表达.表型分析表明:与野生型对照相比,转基因植株的侧根数量显著减少,生长受到抑制.
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