【摘 要】
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目的:克隆、表达菠萝泛菌(Pantoea ananatis)木聚糖酶基因。方法:以菠萝泛菌Y1菌株基因组DNA为模板,通过PCR方法获得该菌木聚糖酶基因XynB,将该基因与pET表达载体连接,转化E.
【机 构】
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徐州工程学院食品(生物)工程学院,
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目的:克隆、表达菠萝泛菌(Pantoea ananatis)木聚糖酶基因。方法:以菠萝泛菌Y1菌株基因组DNA为模板,通过PCR方法获得该菌木聚糖酶基因XynB,将该基因与pET表达载体连接,转化E.coli BL21(DE3)菌株,构建表达重组木聚糖酶的菌株pETxynB/BL21(DE3)。结果:采用0.1mmol/L的IPTG诱导重组菌株,3h后表达出大量的重组木聚糖酶。采用保持蛋白活性的方法回收获得纯度大于95%的重组木聚糖酶。等电聚焦实验分析纯化后的重组木聚糖酶XynB等电点为7.3。该重组酶在60℃、pH 6时相对酶活性最高。结论:该文为菠萝泛菌木聚糖酶的进一步开发提供了研究基础。
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