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观察泛素特异性蛋白酶USP4对转化生长因子-βⅠ型受体(TGFβRI)的去泛素化调节及其对乳腺癌细胞生物学活性的调控。
方法通过慢病毒感染构建过表达USP4的稳定乳腺癌细胞株BT-549。在乳腺癌细胞中表达外源性泛素，通过泛素化实验验证USP4对TGFβRI的泛素化修饰。采用克隆形成实验和划痕实验检测USP4对乳腺癌细胞克隆形成能力、迁移能力的影响。
结果过表达USP4的稳定乳腺癌细胞株中USP4 mRNA的表达量(ΔCt＝3.43±0.05)是空白对照细胞(ΔCt＝7.26±0.03)的14.22倍，差异有统计学意义(t＝69.350，P＝0.000)；USP4蛋白的表达量是空白对照细胞的4.99倍，差异有统计学意义(t＝28.440，P＝0.000)。过表达USP4后TGFβRI的体外泛素化水平明显降低。在克隆形成实验中，稳定过表达USP4、病毒对照及空白对照的BT-549细胞克隆形成率分别为(25.83±1.01)%、(11.83±0.60)%、(7.17±0.60)%，分别t＝11.880、15.840，差异有统计学意义(P＝0.000)。在划痕试验中，放大200倍视野下观察稳定过表达USP4、病毒对照及空白对照的BT-549细胞，每个视野可见发生迁移的细胞个数为(56.67±1.76)、(27.00±1.16)、(27.33±1.45)个，t＝14.070、12.840，差异有统计学意义(P＝0.000)。
结论USP4可通过其去泛素化酶的活性解除TGFβRI耦联的泛素链稳定TGFβRI的表达，从而增强乳腺癌细胞的生物学活性。