【摘 要】
：
克隆牦牛过渡蛋白2(transition protein 2,TNP2)基因并分析其分子特征,调查TNP2基因和蛋白在不同发育阶段牦牛睾丸中的表达差异,为研究其在睾丸发育及精子发生中的作用提供依据.采集不同发育阶段牦牛睾丸(初生期、幼年期、性成熟初期、性成熟后期、老年期)组织,在克隆测序的基础上对TNP2基因进行分子特征分析;利用免疫组化(IHC)、荧光定量PCR (RT-qPCR)以及Western blot技术检测TNP2蛋白在牦牛睾丸组织中的定位及TNP2基因和蛋白在牦牛睾丸组织中的表达量.结果 显
【机 构】
：
甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070;金川区农业农村局,甘肃金川737100;西吉县农业农村局,宁夏西吉756299
论文部分内容阅读
克隆牦牛过渡蛋白2(transition protein 2,TNP2)基因并分析其分子特征,调查TNP2基因和蛋白在不同发育阶段牦牛睾丸中的表达差异,为研究其在睾丸发育及精子发生中的作用提供依据.采集不同发育阶段牦牛睾丸(初生期、幼年期、性成熟初期、性成熟后期、老年期)组织,在克隆测序的基础上对TNP2基因进行分子特征分析;利用免疫组化(IHC)、荧光定量PCR (RT-qPCR)以及Western blot技术检测TNP2蛋白在牦牛睾丸组织中的定位及TNP2基因和蛋白在牦牛睾丸组织中的表达量.结果 显示,成功克隆牦牛TNP2的基因CDS区序列,分子特征预测TNP2为可溶性的膜外蛋白,有多个磷酸化位点;其二级结构包含α螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲,其核苷酸序列及氨基酸序列与其他哺乳动物之间的同源性较低.RT-qPCR结果显示,TNP2 mRNA在老年期睾丸的相对表达量极显著(P＜0.01)高于其他4个时期,且在幼年期极显著(P＜0.01)高于初生期、性成熟早期和性成熟后期,而初生期与性成熟早期和性成熟后期三者之间无显著差异(P＞0.05).Western blot结果显示TNP2蛋白在性成熟早期和性成熟后期的表达量极显著(P＜0.01)高于初生期、幼年期和老年期,且幼年期和老年期极显著高于初生期(P＜0.01).IHC结果显示,TNP2蛋白在牦牛睾丸中圆形精细胞以及精子中呈强阳性表达,而在精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、支持细胞及睾丸同质细胞呈弱阳性表达.研究表明,TNP2可能参与了牦牛精子发育过程中圆形精子细胞向长形精子细胞转换过程中细胞核蛋白的转换,为进一步探明牦牛精子形成机制及其长期生活在高寒低氧环境中的耐低氧机制与繁殖能力低之间的关系提供了基础资料.
其他文献
2021年5月罗平县张某养殖的160头生猪发病,根据发病史,临床症状、病理变化、实验室诊断为猪丹毒,经采取综合防治措施,病情得到有效控制,仅供广大同仁及养猪户参考.
Background:Fat deposition is an important economic consideration in pig production. The amount of fat deposition in pigs seriously affects production efficiency, quality, and reproductive performance, while also affecting consumers\' choice of pork. Wei
Background:Skeletal muscle development, a long-term and complex process, is controlled by a set of the myogenic genes. Circular RNAs (circRNAs), a class of noncoding RNA, have been shown to regulate various biological processes. Recent studies indicate ci
Background:Epigenetic regulation of the gene expression results from interaction between the external environment and transcription of the genetic information encoded in DNA. Methylated CpG regions within the gene promoters lead to silencing of the gene e
旨在解决现有绿壳蛋鸡品种存在的一些问题以满足产业发展需要.本研究主要利用我国地方鸡资源,通过配合力测定、疫病净化、绿壳基因分子检测技术、随机回归模型分析等育种方法,经过5个世代以上的系统选育,培育出神丹6号绿壳蛋鸡配套系,其通过5个世代以上的系统选育,培育出神丹6号绿壳蛋鸡配套系.父母代种鸡和商品代鸡均具有地方鸡外貌特征和优良的蛋肉品质,父母代种鸡产蛋率高、蛋重适中,商品代鸡72周龄产蛋数262个、母鸡体重1532 g,43周龄蛋重50.4 g、蛋壳强度3.89 kg/cm2、哈氏单位79.4、蛋黄比率3
Background:A run of homozygosity (ROH) is a consecutive tract of homozygous genotypes in an individual that indicates it has inherited the same ancestral haplotype from both parents. Genomic inbreeding can be quantified based on ROH. Genomic regions enric
Background:This study investigated the effect of melatonin (MT) on cell cycle (G1/S/G2/M) of parthenogenetic zygotes developed from vitrified-warmed mouse metaphase Ⅱ(MII) oocytes and elucidated the potential mechanism of MT action in the first cleavage o
Background:Tan sheep, an important local sheep breed in China, is famous for their fur quality. One-month-old Tan sheep have white, curly hair with beautiful flower spikes, commonly known as“nine bends”, which has high economic value. However, the“nine be
旨在以植物乳杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母混合菌固态发酵豆渣饲料.利用正交试验根据混菌比例、接种量、水分、发酵温度和发酵时间等因素,对发酵后豆渣饲料的pH值、活菌数、还原糖、氨态氮浓度、乳酸和挥发性脂肪酸含量等指标的影响,筛选出混菌固态发酵豆渣饲料的最优工艺,并在此基础上,对发酵前后豆渣饲料的营养物质含量进行测定.结果 表明,混菌发酵豆渣饲料的最佳工艺条件为:3株试验菌的接种比例为:植物乳杆菌∶枯草芽孢杆菌∶酿酒酵母=3∶2∶1、接种量为10％、固态培养基含水量为50％、温度为35℃、发酵时间为48 h.与
Background:Oxidative stress in placenta is associated with the occurrence of adverse pregnancy outcomes in sow, but there are few satisfactory treatment strategies for these conditions. This study investigated the potential of cysteamine (CS) as an antiox