二氢槲皮素对大肠杆菌的抑菌作用机理

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食源性病菌给食品安全带来的挑战是重大的。二氢槲皮素(DHQ)可作为食品防腐剂,但目前未见其抑菌机理的相关报道。在实验中DHQ被确定对6种食源性病菌,即金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌和热带假丝酵母菌均有显著(P<0.05)抑制作用,且对大肠杆菌的抑制活性最佳,故以大肠杆菌为指示菌,研究DHQ的抑菌机理。利用扫描电镜和透射电镜观察到在DHQ作用下的大肠杆菌严重变形,表现出粘连、折叠、质壁分离、出现空泡结构等现象。荧光探针被用来测定膜内活性氧(ROS)水平,结果显示DHQ能显著(P<0.05)增加细胞内的ROS水平。利用Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞膜的通透性和完整性,发现随着DHQ浓度增加,细胞膜通透性显著(P<0.05)增加,细胞膜的完整性遭到破坏。使用罗丹明123检测细胞膜电位,结果表明DHQ会引起大肠杆菌细胞膜去极化,造成膜电位显著(P<0.05)降低。细胞膜内Ca2+检测表明DHQ会导致胞内Ca2+外漏,影响菌体的正常生长代谢和功能活动。采用PI/RNase染色缓冲液检测细胞周期,结果表明DHQ干扰了大肠杆菌正常的细胞周期。研究结果揭示了DHQ主要作用于细胞膜,影响正常传代,从而达到抑制大肠杆菌的效果。
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