【摘 要】
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目的有效地提取铁皮石斛高质量的RNA,为研究环境胁迫对铁皮石斛生长与代谢影响的分子表达机制奠定基础。方法建立声波处理的刺激组与对照组,改良苯酚-氯仿法制备的RNA,分光光
【机 构】
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重庆邮电学院生物信息学院,重庆大学生物工程学院生物力学与组织工程教育部重点实验室
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目的有效地提取铁皮石斛高质量的RNA,为研究环境胁迫对铁皮石斛生长与代谢影响的分子表达机制奠定基础。方法建立声波处理的刺激组与对照组,改良苯酚-氯仿法制备的RNA,分光光度法检测其量,1.0%变性琼脂糖凝胶电泳检测其完整性;所得的总RNA经过RT-PCR扩增,6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检测显示其差异cDNA片段。结果提取的总RNA A260/A230为3.16,A260/A280为1.96,产量达0.27μg/m g,电泳条带清晰,完整性良好,可筛选出明显的差异cDNA片段,分子质量在240~600 bp。结论用该方法能高质高量地提取富含多糖的药用植物总RNA。
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