【摘 要】
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目的:探讨不同能量代谢途径对细胞存活的影响以及抗氧化基因在葡萄糖缺失模型中导致细胞死亡的作用.方法:采用EBSS 建立体外培养PC12 细胞葡萄糖缺失模型,采用2-DG 抑制糖酵解,Oligo 抑制有氧氧化.MTT 法检测细胞生存率;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞术检测细胞死亡方式;Hoechst 33342 染色观察细胞核形态;Western blot 和real-time PCR 检测凋亡及
【机 构】
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吉林大学基础医学院病理生理学系,吉林长春130012
【出 处】
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中国病理生理学会第十届全国代表大会
论文部分内容阅读
目的:探讨不同能量代谢途径对细胞存活的影响以及抗氧化基因在葡萄糖缺失模型中导致细胞死亡的作用.方法:采用EBSS 建立体外培养PC12 细胞葡萄糖缺失模型,采用2-DG 抑制糖酵解,Oligo 抑制有氧氧化.MTT 法检测细胞生存率;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞术检测细胞死亡方式;Hoechst 33342 染色观察细胞核形态;Western blot 和real-time PCR 检测凋亡及抗氧化相关基因的表达.结果:与对照组相比,EBSS(E)组、E+2-DG 组、E+Oligo 组以及E+2-DG+Oligo 组PC12 细胞的生存率均明显下降,以2-DG 组下降最显著.进一步证明细胞凋亡率及坏死率亦明显增加是生存率下降的主要因素,以凋亡率增加更为明显.抗氧化基因SOD2、HO-1 和NQO-1 在转录及翻译水平上均明显降低.在加入外源性抗氧化剂NAC 后,PC12 细胞的生存率明显升高.结论:PC12 细胞在糖缺失时主要依靠糖酵解来维持细胞存活.干扰糖酵解和有氧氧化通过降低抗氧化基因的表达,降低PC12 细胞抗氧化能力,促进PC12 细胞凋亡.
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