为制备可鉴别猪瘟病毒（CSFV）疫苗株（LPC）和流行株的单克隆抗体（MAb），并解析流行株逃逸宿主免疫血清中和抗体的机制，本研究利用猪瘟兔化弱毒疫苗株的E2蛋白免疫BALB/c小鼠，将免疫小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞电融合，利用间接免疫荧光试验（IFA）筛选分泌抗CSFV E2蛋白MAb的杂交瘤细胞，利用IFA和western blot鉴定MAb与猪瘟兔化弱毒疫苗株及其不同基因型流行株或E2蛋白的反应原性以明确MAb的病毒反应谱。结果显示，本研究获得了一株仅与基因1.1和3.1亚型CSFV反应，但不与其他8个亚型流行株或E2蛋白反应的MAb TCH045，表明该MAb能够鉴别CSFV疫苗株和当前优势流行株。本实验进一步点突变E2蛋白后利用western blot对TCH045识别的抗原表位进行鉴定，结果显示，疫苗株E2蛋白的G19、L21、A23、G24和L26突变后，TCH045与突变的E2蛋白不反应，表明这些氨基酸参与组成该MAb识别的抗原表位，其中G24为关键氨基酸残基，而不与TCH045反应的流行株在该位点为E24。此外，TCH045能够中和疫苗株（HCLV株和LPC株），但不能中和当前优势流行株，这可能是流行株逃逸免疫血清被中和的原因之一。综上所述，本研究获得了一株新的能区别CSFV疫苗株和流行株的中和MAb，可以用于疫苗免疫和流行株感染的血清学鉴别诊断技术的研发，初步揭示了CSFV流行株逃逸免疫血清中和的机制，为研发新型猪瘟疫苗提供了重要的科学数据。