【摘 要】
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目的 探讨白藜三醇(RSV)对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的调控及其相关机制.方法 采用组织块贴壁法体外培养VSMCs,细胞分为3组:空白组(CON组)、FBS组(含20％胎牛血清
【机 构】
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徐州医科大学附属医院心血管内科,江苏徐州,221002;邳州市人民医院心血管内科,江苏邳州,221300;徐州医科大学研究生学院,江苏徐州,221004
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目的 探讨白藜三醇(RSV)对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的调控及其相关机制.方法 采用组织块贴壁法体外培养VSMCs,细胞分为3组:空白组(CON组)、FBS组(含20％胎牛血清的培养基)、RSV组.CCK-8法检测血管平滑肌细胞活性以确定RSV最佳作用浓度及时间,qPCR法检测各组细胞内microRNAs的表达水平.为了证实RSV是否通过调控miR-21的表达发挥抗VSMCs增殖作用,除了上述3组,另增加miR-21过表达组(miR-21 mimics组)和沉默组(miR-21 inhibitor组):miR-21 mimics+ RSV组、miR-21 inhibitor组、miR-21 mimics组和miR-21转染阴性对照组(NC组),Western blot检测各组人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达水平,流式细胞术(FCM)检测各组细胞周期明确细胞增殖状况.结果 与CON组相比,FBS组miR-21表达明显上调(P＜0.05),RSV组miR-21表达明显下调(P＜0.05).与CON组相比,FBS组和miR-21 mimics组PTEN蛋白表达量下降(P＜0.05),而细胞明显增殖(P＜0.05);RSV组和miR-21 inhibitor组PTEN蛋白表达量升高(P＜0.05),PCNA蛋白表达下降,细胞增殖明显抑制(P＜0.05).与miR-21 mimics+ RSV组相比,miR-21 mimics组PTEN蛋白表达量下降,而PCNA蛋白表达增多,细胞明显增殖(P＜0.05),RSV组则相反(P＜0.05).结论 RSV通过抑制miR-21表达而调控其下游靶基因这一途径在大鼠VSMCs中发挥抗增殖作用.
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