【摘 要】
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目的 探究A型肉毒素（BTXA）对肌腱成纤维细胞增殖和TGF-β1、bFGF、MMP-2表达的影响。方法 采用组织块法提取培养成年新西兰兔脚趾深屈肌腱成纤维细胞，分为对照组（Ctrl组）、低剂量组、中剂量组及高剂量组，分别给予0、10、30、50 U/mL BTXA。MTT检测细胞体外增殖活性，流式细胞术检测细胞周期分布；免疫荧光检测细胞黏附及形态变化；ELISA和qRT-PCR分别检测细胞内TG
【基金项目】
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杭州市科技计划项目（20171226Y94）；
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目的 探究A型肉毒素（BTXA）对肌腱成纤维细胞增殖和TGF-β1、bFGF、MMP-2表达的影响。方法 采用组织块法提取培养成年新西兰兔脚趾深屈肌腱成纤维细胞，分为对照组（Ctrl组）、低剂量组、中剂量组及高剂量组，分别给予0、10、30、50 U/mL BTXA。MTT检测细胞体外增殖活性，流式细胞术检测细胞周期分布；免疫荧光检测细胞黏附及形态变化；ELISA和qRT-PCR分别检测细胞内TGF-β1、bFGF、MMP-2蛋白及mRNA表达变化。结果 经BTXA处理的各组细胞培养48 h后，细胞增殖活力均显著低于对照组，差异有统计学意义（F=95.573,P＜0.05）;0、10、30、50 U/mL BTXA阻滞细胞周期停滞在G0/G1期的比例分别为（38.74±4.21）%、（43.13±6.36）%、（48.37±7.58）%、（61.03±7.63）%,组间差异有统计学意义（F=76.684,P＜0.05）。免疫荧光结果显示BTXA显著抑制细胞内Actin-tracker Green表达。ELISA及qRT-PCR结果显示，高剂量组细胞TGF-β1表达水平显著低于其他三组，中、高剂量组细胞MMP-2含量高于对照组和低剂量组；与对照组相比，中、高剂量组细胞TGF-β1、bFGF mRNA相对表达量显著降低，且高剂量组细胞TGF-β1 mRNA表达水平显著低于其他3组；各组细胞MMP-2 mRNA表达水平随BTXA浓度增加而升高；差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 BTXA可能通过抑制TGF-β1、bFGF表达促进MMP-2活性，发挥抑制肌腱成纤维细胞增殖的作用。
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