【摘 要】
：
背景与目的 已有的研究表明,nm23-H1基因是一个重要的肺癌转移抑制基因,为了筛选与该基因表达相关的差异表达基因.本研究拟构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981
【机 构】
：
四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室,四川大学华西医院肿瘤中心,天津医科大学总医院天津市肺癌研究所
论文部分内容阅读
背景与目的 已有的研究表明,nm23-H1基因是一个重要的肺癌转移抑制基因,为了筛选与该基因表达相关的差异表达基因.本研究拟构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆与nm23-H1转移相关的基因奠定基础.方法利用抑制消减杂交(suppressive subtractive hybridization,SSH)技术构建nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)间差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库,经蓝白菌落筛选克隆,并PCR反应鉴定.结果 成功构建了该两株细胞株差异表达基因的正向和反向消减cDNA文库.经蓝白菌落筛选,正向消减文库总共获得约300个白斑克隆,反向消减文库总共获得约400个白斑克隆,从正反向消减文库中各挑选96个克隆进行PCR扩增检测是否有插入片段,结果显示在挑选的正向文库中有84个克隆有插入片段,反向文库中有83个克隆有插入片段.其片段大小范围为(300-750)bp.结论 抑制消减杂交是克隆差异表达基因的有效方法,我们应用SSH法和T/A克隆技术成功建立了nm23-H1基因转染前后人大细胞肺癌细胞株(L9981和L9981-nm23-H1)差异表达基因的抑制消减cDNA文库.nm23-H1基因在肺癌细胞中的表达可能影响某些转移相关基因的差异表达.
其他文献
俄藏Дx18165R、Дx18165V,在((俄藏敦煌文献))没有命名,但经仔细考察发现,俄Дx18165R及Дx18165V中的内容都与医学有关,其中俄Дx18165R提到"众生"慈悲"等佛家用语,还引用
例1,男,23岁.因"左侧结核性渗出性胸膜炎"于2007年2月20日入院,抽液后,因胸膜腔注射丁胺卡那霉素0.2后,注射后大约半小时后突然出现呼吸困难,烦躁不安,呻吟不止,呼吸不规则.
患者,男,83岁,因"反复发热伴周身皮疹5月"于2007年2月29日人院.患者2006年9月起无明显诱因反复出现发热,弛张热型,最高40.5℃,无畏寒、咳嗽,有时面部、颈胸及上肢出现红色丘
目的:通过分析老年人尿微量白蛋白(MA)的相关因素,来寻找减少老年人MA排泄的途径。方法:对465例老年人进行问卷调查、24h动态血压检测、实验室检查和MA检测,运用Logistic回归
目的 对涉及养生知识的中医古籍进行数字化处理,在有效保护中医养生古籍的前提下,对中医古籍养生知识进行充分利用.方法 选用ORACLE 9i数据库软件,建立由10个数据库表组成的
目前已有上千万妇女进入绝经期,在农村更有绝经10年以上未及时取环者,自去年我区开展为全区绝经期妇女免费取环,到今年8月底共有982例绝经期妇女取环,其中52例为绝经10年以
目的 分析脑血吸虫病的影像学特点,提出诊断要点和治疗方法选择.方法 回顾性分析大坪医院1998年11月至2007年7月诊治21例脑血吸虫病的临床资料,全部行了CT和MRI检查,免疫学检
目的 初步分析试点区县执行《抗结核药品管理标准操作手册》(《SOP手册》)的效果.方法对比分析27个试点区县执行《SOP手册》前(2007年1季度)与执行半年后(2007年4季度)药品缺
糖尿病性黄斑水肿(DME)是糖尿病视网膜病变视力丧失的常见原因.其确切的发生机制尚不清楚,与血-视网膜屏障的破坏有关.其主要治疗方式有激光光凝、药物、手术治疗.
抗菌肽分子呈双亲性的α-螺旋结构可使细菌、真菌、寄生虫的质膜形成离子通道,从而导致这些病原体死亡.抗菌肽分子也可通过影响它们的能量转运和代谢,损害它们的呼吸链的功能