【摘 要】
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目的:探究不同浓度的黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ,As-Ⅳ)对肝癌细胞的作用及其作用机制.方法:采用不同浓度黄芪甲苷,按照不同作用时间处理肝癌细胞;采用MTT法检测不同浓度黄芪
【机 构】
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郑州市中心医院 肿瘤内科,河南 郑州 467000
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目的:探究不同浓度的黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ,As-Ⅳ)对肝癌细胞的作用及其作用机制.方法:采用不同浓度黄芪甲苷,按照不同作用时间处理肝癌细胞;采用MTT法检测不同浓度黄芪甲苷对肝癌细胞的毒性作用;运用放线菌素D(Actinomycin D,ActD)诱导细胞凋亡构建肝癌细胞凋亡模型,采用Hoechst33258染色法和流式细胞术验证肝癌细胞凋亡情况,采用流式细胞术检测一定浓度的黄芪甲苷处理放线菌素D诱导后的肝癌细胞凋亡率,采用western blot法验证黄芪甲苷对蛋白激酶α(Pro-tein kinase C α,PKC-α)蛋白和细胞外调节蛋白激酶(ExtracelluLar reguLated protein kinases,ERK)通路蛋白的影响.结果:浓度为40μmol/L的黄芪甲苷处理24h细胞活性为0μmol/L时的80％,不会显著影响肝癌细胞活性,且黄芪甲苷对肝癌细胞活性的影响呈剂量和时间依赖性.放线菌素D浓度为2μg/mL处理24h时肝癌细胞凋亡率为45％,可有效诱导肝癌细胞凋亡.40μmol/L黄芪甲苷处理24 h可有效抑制2μg/mL放线菌素D诱导的肝癌细胞凋亡,细胞凋亡率为8％,显著低于2μg/mL放线菌素D处理组细胞凋亡率27％(P＜0.05),并可有效抑制细胞膜PKC-α和p-ERK1/2表达量升高.结论:黄芪甲苷可通过抑制PKC-o活化后从细胞质向细胞膜迁移,有效抑制放线菌素D诱导的肝癌细胞凋亡.
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