【摘 要】
：
目的:观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B1(Lamin B1)表达的调控作用,并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用.方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测0,2,4,6,8,10g·L-1槐耳清膏在不同时间下对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用.采用吖啶橙染色法分析槐耳清膏给药对VCaP细胞中自噬溶酶体形成的影响.借助蛋白免疫印迹法(Western blot)检测槐耳清膏给药后细胞中与自噬密切相关的蛋白微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC3),自噬相关蛋白3(Atg3),自
【机 构】
：
北京中医药大学中药学院中药现代研究中心,北京100029
论文部分内容阅读
目的:观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B1(Lamin B1)表达的调控作用,并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用.方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测0,2,4,6,8,10g·L-1槐耳清膏在不同时间下对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用.采用吖啶橙染色法分析槐耳清膏给药对VCaP细胞中自噬溶酶体形成的影响.借助蛋白免疫印迹法(Western blot)检测槐耳清膏给药后细胞中与自噬密切相关的蛋白微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC3),自噬相关蛋白3(Atg3),自噬相关蛋白5(Atg5),自噬相关蛋白7(Atg7)的表达.采用CCK-8法检测槐耳清膏与自噬抑制剂(Bafilomycin A1)联合给药及槐耳清膏单独给药对细胞增殖的作用.通过Western blot检测槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B1表达的影响,并采用RNA干扰技术探究Lamin B1在槐耳抗人前列腺癌VCaP细胞增殖中的作用.结果:与空白组比较,槐耳清膏能抑制人前列腺癌VCaP细胞的增殖(P＜0.01),且呈时间与浓度依赖性.槐耳清膏给药后可促进VCaP细胞中自噬溶酶体的生成.与空白组比较,槐耳清膏能上调VCaP细胞中与自噬进程密切相关的蛋白LC3-II,Atg3,Atg5,Atg7表达水平(P＜0.05),槐耳清膏能够诱导VCaP细胞自噬的发生.进一步研究发现抑制自噬能够降低人前列腺癌VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P＜0.05).与空白组比较,槐耳清膏给药能够抑制人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B1蛋白表达(P＜0.01),下调LaminB1蛋白表达,在一定程度上也能够减弱VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性(P＜0.01).结论:自噬活化和Lamin B1表达下调可能参与了槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用,能够为槐耳临床应用提供一定的理论基础.
其他文献
目的:应用网状Meta分析方法比较与评价5个经典名方治疗儿童支气管哮喘(BA)及咳嗽变异性哮喘(CVA)急性发作的临床疗效,并分别进一步比较与评价其中不同方剂治疗寒性哮喘或热性哮喘两大类证型的临床疗效.方法:运用计算机检索并筛选维普数据库(VIP),中国知网(CNKI)与万方(Wanfang Data)等数据库中关于5个经典名方(三子养亲汤、麻杏石甘汤、射干麻黄汤、小青龙汤、定喘汤)治疗哮喘急性发作的随机对照试验(RCT),时间区间段为创库以来至2021年8月15日.对纳入文献进行评估和筛选,并完成资料提
目的:采用Seahorse细胞能量代谢分析仪,通过缺氧损伤的高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)建立一种线粒体能量代谢评价方法并探究益气解毒方的线粒体保护作用.方法:应用缺氧小室体外构建PC12细胞损伤模型,实验设置空白组,模型组(Model),益气解毒方高、中、低剂量组(25,5,1μ.tmol·L-1;YQ高、中、低)及阳性药曲美他嗪组(TMZ),每组3复孔,实验重复3次.采用建立的能量代谢分析方法对细胞线粒体复合物活性进行检测,筛选最佳给药浓度;随后设置益气解毒方全方及各拆方组,采用Seaho
目的:观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响,探讨其作用机制是否与干预能量代谢相关.方法:6周龄SD雄性大鼠30只,随机分为空白组、丹栀逍遥散水煎剂组(8.99g·kg-1)、西黄丸组(0.55g·kg-1),药物干预7d,分离血清.噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,AnnenxinV/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞凋亡,葡萄糖含量检测试剂盒检测细胞内葡萄糖含量,免疫荧光染色法检测细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达情况,Seahorse Xfe细胞能量
Dear Editor,rnAlzheimer\'s disease (AD) is the most common cause of dementia among the older population,and is characterized by amyloid-beta (Aβ) accumulation,hyperphosphorylation of tau,and finally neurodegeneration in the brain[1].Aβ is the major path
目的:应用网络药理学的研究方法筛选山慈菇-漏芦药对治疗乳腺癌的作用靶点及相关信号通路,通过体外实验明确其作用机制.方法:通过运用中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库检索获取山慈菇-漏芦的主要化学成分及相关作用靶点;使用GendCards筛选乳腺癌疾病的相关靶标基因;通过Venn软件筛选出药物与疾病的共同作用靶点;构建出药物-疾病的靶点网络,蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络构建;通过基因本体(GO)富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集对有效作用靶点进行分析;通过细胞增殖与活性检测(C
目的:研究血竭石油醚提取物(SDPEF)对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞增殖、凋亡、体外迁移能力及自噬的影响,并阐明其分子作用机制.方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测SDPEF(0,20,40,60,80 mg·L-1)作用24,48,72 h时,对人胃癌HGC-27和MGC-803细胞体外增殖的影响.借助Hoechst染色实验观察不同浓度的SDPEF作用48 h后对HGC-27和MGC-803细胞凋亡的影响.采用流式细胞术检测不同浓度SDPEF作用48 h,对HGC-27和MGC-
目的:采用不同诱导剂建立3种斑马鱼血瘀模型,优选最适宜评价三七活血能力的模型.方法:花生四烯酸(AA),普纳替尼(Ponatinib),异丙肾上腺素(ISO)分别建立斑马鱼血瘀模型,设置正常组、模型组、阳性药组、不同浓度三七水提物冻干粉组,计算心脏红细胞染色强度、心脏凋亡细胞荧光强度,评价三七的抗血栓作用和抗心肌缺氧能力.基于优选的评价三七活血化瘀活性的血瘀模型—AA,ISO诱导的斑马鱼血瘀模型,比对三七水提取物及70％甲醇提取物之间的活性,并采用UHPLCLTQ-OrbitrapMS/MS技术比对其化学
目的:观察黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤模型大鼠的疗效及相关作用机制.方法:采用将80只健康雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,黄芩苷低、中、高剂量组,地塞米松组(DEX),SB203580组和黄芩苷+SB203580组(BA+SB203580),每组10只.黄芩苷低、中、高剂量组分别腹腔注射不同剂量(10,50,100 mg·kg-1)的BA溶液;DEX组腹腔注射5 mg·kg-1的DEX溶液;SB203580组腹腔注射0.5 mg·kg-1的SB203580溶液;黄芩苷+SB203580组腹腔
目的:研究补肾中药复方右归丸对自然衰老致卵巢功能低下的大鼠血管生成的影响与CXC趋化因子8(CXCL8)/趋化因子受体1/2(CXCR1/2)信号通路及血管生成素-1(Ang-1),血管生成素-2(Ang-2)的关系,探讨其改善卵巢功能的作用机制.方法:将56只雌性SD大鼠随机分为青年组8只、自然衰老致卵巢功能低下的雌性大鼠模型组48只,青年组大鼠常规饲养,48只模型组大鼠常规饲养过程中做5～7d阴道脱落细胞学涂片,将连续4个动情周期阴道细胞学表现为动情周期长、之后持续动情、反复假妊娠的大鼠作为初老大鼠,
目的 观察多磺酸黏多糖乳膏联合地奈德乳膏对慢性湿疹患者临床体征评分及皮肤生理功能的影响.方法 前瞻性地选取2018年7月-2020年7月空军军医大学第一附属医院西京医院收治的80例慢性湿疹患者作为研究对象,简单数字随机表法随机分为对照组(40例,地奈德乳膏2次/d)和观察组(40例,地奈德乳膏+多磺酸黏多糖乳膏2次/d).治疗1个月后比较疗效、临床体征积分及皮肤生理功能.结果 两组患者治疗后湿疹面积及严重程度指数(EASI)评分均显著低于治疗前(P＜0.05),治疗后观察组EASI评分显著低于对照组(P＜