目的探讨外周血造血干细胞（peripheral blood stem cells,PBSCs）的采集、低温冷冻保存、复苏与质检的方法。方法 2014年6月至2016年12月火箭军总医院成功采集191人次PBSCs,在无菌条件下加入主要成分为二甲基亚砜（dimethyl sulphoxide, DMSO）的冷冻保存液,经程序降温仪降至-80℃后置于-196℃液氮保存。冻存前和解冻后分别进行单个核细胞（mononuclear cell, MNC）和CD34+细胞计数及粒单系祖细胞集落（colony forming unit granu-locyte-macrophages, CFU-GM）培养。结果共成功冻存266份的造血干细胞。采集的干细胞成品量、细胞浓度、MNC计数、CD34+计数、CFU-GM均值分别为（164.12±97.71）ml、（3.00±0.87）×10¹¹个、（4.36±1.39）×10⁸/kg、（5.76±1.32）×10⁶/kg、（80.00±19.00）×10⁶。对复苏的178份造血干细胞进行质量检测,MNC和CD34+细胞计数、CFU-GM回收率及台盼蓝拒染率分别为（95.64±2.72）%、（93.92±3.51）%、（91.25±3.13）%和（94.10±6.00）%。冻存前后的外周血干细胞均可满足临床移植的需求。结论本研究采用的PBSCs采集、低温冷冻保存、复苏与质检的方法对干细胞损伤较小,安全有效,适合临床推广使用。