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目的
建立荧光定量PCR检验卡他莫拉杆菌的实验室诊断方法并检验临床样本。
方法针对卡他莫拉杆菌外膜蛋白COPB设计引物及探针；构建含卡他莫拉杆菌目的基因片段的质粒，梯度稀释后作为标准品，绘制标准曲线；验证实验方法的敏感性；通过检测7种病原体标准株验证该方法的特异性。用新建荧光定量PCR检测321例诊断为哮喘的儿童患者咽拭子标本。
结果绘制新建荧光定量PCRTaqman探针法检测质粒标准品的标准曲线，新建实验室诊断方法的敏感性可达10拷贝/反应，研究方法可成功区分卡他莫拉杆菌与其他6种病原体DNA。检测321例临床咽拭子样本，卡他莫拉杆菌阳性25例，阳性检出率为7.79%。
结论新建荧光定量PCR法具有较高的灵敏度、特异性，能简单、快速、准确、灵敏地检测卡他莫拉杆菌，可以应用于临床样本的检测。