连续流PCR芯片DNA扩增技术的研究

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提出了一种基于二温区的连续流PCR微流控芯片,并通过有限元方法分析了其内部流速场与温度场分布,数值分析结果显示:(1)芯片中液体流速高于5. 128 mm/s时,液体在微通道中心流速与靠近内壁的流速差异较大,不利于PCR反应;(2)当CF-PCR微流控芯片两侧施加96℃和65℃高温时,液态水可以在0. 1 mm内迅速实现变温,且中间未施温部分保持在73℃,为DNA实现PCR提供了变性、退火与延伸所需温度。实验结果表明,压力法进样可使流速误差稳定在3%以内,采用铝块对PCR芯片加热可使温度误差控制在0. 3%。最后在CF-PCR芯片内对牙龈卟啉单胞菌实施了PCR,并用毛细管电泳检测了其PCR产物,数据显示在芯片内4’51″可以成功实现PCR。本方法对快速PCR仪器的开发具有重要的应用价值。
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