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2010年8月28日,我区新太、远达两所小学部分学生食用某营养配餐中心提供的食物后引起食物中毒。经流行病学调查、临床表现和细菌学检验,证实为一起由蜡样芽胞杆菌污染所致的食物中毒。学生中毒症状以消化道表现为主,从吃剩的盒饭和配餐中心保留的样品中均分离出菌相为G+有芽胞大杆菌。经检验鉴定为蜡样芽胞杆菌。
流行病学调查
2010年8月28日,我区新太、远达两所小学135名学生中午就餐时,食用我区一营养配餐中心提供的配餐,餐后20分钟~1小时陆续有学生出现胃部不适、恶心、呕吐、头晕、等急性胃肠炎症状,无高热。据监督人员调查,配餐中心提供的盒饭为蛋炒饭,菜为油豆腐干及炝拌黄瓜。学生反映进食时发觉米饭有异味,且有丝状物。大部分学生只吃了几口,所以,只有3个学生症状较重,其他学生就医后陆续离开医院。
实验室检验
样品来源:学生吃剩的盒饭及营养配餐中心保留的样品。
检验方法:按《食品卫生检验方法微生物学部分》GB/T 4789-2003。
检验项目:蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌检测。
方法及结果:①样品经7.5%NaCl肉汤增菌后转种血平板,经37℃ 18~24小时培养后未见可疑金黄色葡萄球菌菌落生长。②将25g检样作10-1~10-6稀释后,将不同稀释度的检样,接种在甘露醇卵黄多黏菌素琼脂平板上经37℃ 12~20小时培养后,学生剩余的盒饭和配餐中心保留的盒饭样本中,均可见大量粉红色菌落生长,菌落周围有粉红色的晕,红色的菌落计数分别为3.1×106个/g、3.3×106个/g。镜检均为G+大杆菌,菌体中间可见卵圆形的芽胞,芽胞不膨大。取甘露醇卵黄多黏菌素琼脂平板上可疑菌落接種肉汤、血平板和营养琼脂,经37℃ 18~24小时培养后,血平板上菌落呈毛玻璃样,有溶血环、不透明。营养琼脂平板上菌落为融蜡样,粗糙、边缘不整齐。肉汤呈混浊样,振摇易乳化。挑取营养琼脂上的纯菌落作生化试验。
鉴别试验:本菌与苏云金芽胞杆菌鉴别:未发现细胞内产生蛋白毒素结晶小体。
根据培养特性、细菌形态、生化试验、鉴别试验及菌落计数,可证实本次食物中毒是由蜡样芽胞杆菌所致。生化分型为3型。
药敏试验:按纸片药敏试验常规进行。该菌对氟哌酸、庆大霉素、链霉素、红霉素、四环素、卡那霉素敏感,对青霉素、先锋霉素、磺胺不敏感。与有关文献报道相符。
讨 论
蜡样芽胞杆菌广泛存在自然界中,易污染米饭和淀粉类食物,蜡样芽胞杆菌污染食物并菌量达到一定数量时,就可引起食物中毒。本次测定米饭中菌数最低达3.1×106个/g。达到致病水平。由于米饭有异味及丝状物,学生食量较少,大部分学生症状不明显。
中小学生营养配餐中心是最近几年新兴的产业,营养调配及卫生状况并不如学生家长期望的那样好,这就需要监管部门提高卫生执法力度,切实防止各种致病菌和条件致病菌对饮食的污染。
中小学校发生食物中毒一般具有群体性,社会影响极大。我们调查时,营养配餐中心介绍,由于供应量大,他们在早晨4:00左右就将米饭做好,并放在保温箱中,到学生中午就餐时,有近7个小时的时间,一旦米饭被污染,细菌经过几个小时的生长繁殖,就达到了致病量,极易引起食物中毒。
蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒有两种不同的临床类型,呕吐型和腹泻型。其中呕吐型潜伏期0.5~5小时,多数为1小时。恶心继而为剧烈而频繁呕吐可达数十次,很像金黄色葡萄球菌引起的食物中毒,少有腹痛和腹泻。所以我们也进行了金黄色葡萄球菌的检验。
进行本菌鉴定时,应与炭疽芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌相鉴别。其中苏云金芽胞杆菌与本菌生化性状极为相似,但苏云金芽胞杆菌细胞内产生蛋白毒素结晶加以鉴别。
参考文献
1 中华人民共和国国家标准.食品卫生微生物学检验.GB/T 4789-2003.
2 中华人民共和国卫生行业标准.蜡样芽胞杆菌食物中毒诊断标准及处理原则.WS/T 82-1996.
3 何晓青,主编.卫生防疫细菌检验.新华出版社,1989:495.
流行病学调查
2010年8月28日,我区新太、远达两所小学135名学生中午就餐时,食用我区一营养配餐中心提供的配餐,餐后20分钟~1小时陆续有学生出现胃部不适、恶心、呕吐、头晕、等急性胃肠炎症状,无高热。据监督人员调查,配餐中心提供的盒饭为蛋炒饭,菜为油豆腐干及炝拌黄瓜。学生反映进食时发觉米饭有异味,且有丝状物。大部分学生只吃了几口,所以,只有3个学生症状较重,其他学生就医后陆续离开医院。
实验室检验
样品来源:学生吃剩的盒饭及营养配餐中心保留的样品。
检验方法:按《食品卫生检验方法微生物学部分》GB/T 4789-2003。
检验项目:蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌检测。
方法及结果:①样品经7.5%NaCl肉汤增菌后转种血平板,经37℃ 18~24小时培养后未见可疑金黄色葡萄球菌菌落生长。②将25g检样作10-1~10-6稀释后,将不同稀释度的检样,接种在甘露醇卵黄多黏菌素琼脂平板上经37℃ 12~20小时培养后,学生剩余的盒饭和配餐中心保留的盒饭样本中,均可见大量粉红色菌落生长,菌落周围有粉红色的晕,红色的菌落计数分别为3.1×106个/g、3.3×106个/g。镜检均为G+大杆菌,菌体中间可见卵圆形的芽胞,芽胞不膨大。取甘露醇卵黄多黏菌素琼脂平板上可疑菌落接種肉汤、血平板和营养琼脂,经37℃ 18~24小时培养后,血平板上菌落呈毛玻璃样,有溶血环、不透明。营养琼脂平板上菌落为融蜡样,粗糙、边缘不整齐。肉汤呈混浊样,振摇易乳化。挑取营养琼脂上的纯菌落作生化试验。
鉴别试验:本菌与苏云金芽胞杆菌鉴别:未发现细胞内产生蛋白毒素结晶小体。
根据培养特性、细菌形态、生化试验、鉴别试验及菌落计数,可证实本次食物中毒是由蜡样芽胞杆菌所致。生化分型为3型。
药敏试验:按纸片药敏试验常规进行。该菌对氟哌酸、庆大霉素、链霉素、红霉素、四环素、卡那霉素敏感,对青霉素、先锋霉素、磺胺不敏感。与有关文献报道相符。
讨 论
蜡样芽胞杆菌广泛存在自然界中,易污染米饭和淀粉类食物,蜡样芽胞杆菌污染食物并菌量达到一定数量时,就可引起食物中毒。本次测定米饭中菌数最低达3.1×106个/g。达到致病水平。由于米饭有异味及丝状物,学生食量较少,大部分学生症状不明显。
中小学生营养配餐中心是最近几年新兴的产业,营养调配及卫生状况并不如学生家长期望的那样好,这就需要监管部门提高卫生执法力度,切实防止各种致病菌和条件致病菌对饮食的污染。
中小学校发生食物中毒一般具有群体性,社会影响极大。我们调查时,营养配餐中心介绍,由于供应量大,他们在早晨4:00左右就将米饭做好,并放在保温箱中,到学生中午就餐时,有近7个小时的时间,一旦米饭被污染,细菌经过几个小时的生长繁殖,就达到了致病量,极易引起食物中毒。
蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒有两种不同的临床类型,呕吐型和腹泻型。其中呕吐型潜伏期0.5~5小时,多数为1小时。恶心继而为剧烈而频繁呕吐可达数十次,很像金黄色葡萄球菌引起的食物中毒,少有腹痛和腹泻。所以我们也进行了金黄色葡萄球菌的检验。
进行本菌鉴定时,应与炭疽芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌相鉴别。其中苏云金芽胞杆菌与本菌生化性状极为相似,但苏云金芽胞杆菌细胞内产生蛋白毒素结晶加以鉴别。
参考文献
1 中华人民共和国国家标准.食品卫生微生物学检验.GB/T 4789-2003.
2 中华人民共和国卫生行业标准.蜡样芽胞杆菌食物中毒诊断标准及处理原则.WS/T 82-1996.
3 何晓青,主编.卫生防疫细菌检验.新华出版社,1989:495.