【摘 要】
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目的:为食品、卫生行业提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的单增李斯特菌(Listeria monocyto-genes)与志贺氏菌(Shigella)多重PCR检测方法。方法:根据单增李斯特菌转录
【基金项目】
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国家质量监督检验检疫总局科研项目(2004QK36);留学回国人员科技活动启动项目(2006);浙江省新苗人才计划项目(2007G60G2080005)
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目的:为食品、卫生行业提供一种简便、灵敏、快速,并且特异性强的单增李斯特菌(Listeria monocyto-genes)与志贺氏菌(Shigella)多重PCR检测方法。方法:根据单增李斯特菌转录调节子基因prfA、志贺氏菌侵袭性质粒抗原H基因ipaH筛选出引物;优化多重PCR的引物浓度、退火温度及Mg2+等条件,分析单一PCR及多重PCR的特异性、灵敏度;结合24h增菌培养,确定多重PCR检测人工污染脱脂灭菌乳的检出限。结果:多重PCR扩增出了预计的PCR产物,即单增李斯特菌(274bp)和志贺氏菌(421bp)。该方法的灵敏度:78pg单增李斯特菌基因组DNA、7.5pg志贺氏菌基因组DNA。多重PCR检测人工污染脱脂灭菌乳,单增李斯特菌与志贺氏菌的灵敏度分别为2cfu/25mL和1.6cfu/25mL。结论:该方法在食品、卫生行业具有很好的应用和开发前景。
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