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本试验通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E，将该基因连接到含有λPL／PR-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中，从而使裂解基因E和启动阻遏系统λPL／PR-cI857串联成为温度敏感的裂解盒，构建重组质粒pBV-E。再将含有E基因的裂解盒插入到App—E．coli穿梭载体pGZRS-18中，构建胸膜肺炎放线杆菌打孔质粒。采用电击穿孔法将其转入胸膜肺炎放线杆菌中，含有打孔质粒的胸膜肺炎放线杆菌在28℃条件下生长到对数生长期，升温42℃诱导E基因的表达，制备了胸膜肺炎放线菌菌影。电镜观察菌影