【摘 要】
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目的 构建含有人肠三叶因子基因cDNA的腺病毒载体,并观察其对肠上皮细胞的感染能力.方法 利用PCR技术扩增hITF基因cDNA全长序列,测序后亚克隆至腺病毒穿梭质粒,转化至含腺病
【机 构】
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徐州医学院附属淮海医院烧伤科,中国人民解放军第九七医院烧伤科
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目的 构建含有人肠三叶因子基因cDNA的腺病毒载体,并观察其对肠上皮细胞的感染能力.方法 利用PCR技术扩增hITF基因cDNA全长序列,测序后亚克隆至腺病毒穿梭质粒,转化至含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1大肠杆菌株BJ5183感受态细胞中进行同源重组,内切酶PmeⅠ线性化后转染HEK293细胞进行病毒包装及扩增,并进行滴度测定.将重组腺病毒感染肠上皮细胞（HT-29）,荧光显微镜观察感染效果.结果 成功构建出重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-hITF,Pme Ⅰ线性化后与骨架质粒pAdEasy-1
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