【摘 要】
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目的:探索适宜于乳猪肝细胞-80℃长期低温保存的冻存保护剂浓度.方法:体外分离乳猪肝细胞,以含不同浓度二甲基亚砜(DMSO,浓度分别为50、100、150和200mL/L)的低温保存液-80℃
【机 构】
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中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所; 中国人民解放军第三军医大学西南医院全军感染病研究所 重庆市400038; 重庆市400038;
【基金项目】
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全国优秀博士专项基金资助课题NO.199947;国家自然科学专项基金资助项目NO.30027001~~
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目的:探索适宜于乳猪肝细胞-80℃长期低温保存的冻存保护剂浓度.方法:体外分离乳猪肝细胞,以含不同浓度二甲基亚砜(DMSO,浓度分别为50、100、150和200mL/L)的低温保存液-80℃分别保存肝细胞30d与60d.复苏后接种培养,对其存活率、贴壁率、白蛋白及尿素合成能力等进行检测,并观察其形态结构变化.结果:不同DMSO浓度的低温保存液保存复苏后猪肝细胞的活力及形态学表现均有所不同,其中含50mL/LDMSO低温保存液组保存效果最差;100mL/L组次之;150mL/L组最佳.150mL/LDMSO低温保存液组保存60d肝细胞复苏后的存活率为81%,贴壁率是79%,较50mL/L与100mL/LDMSO组有显著性差别(P<0.05),150mL/LDMSO组复苏后接种培养肝细胞的形态与未冻存组无明显差别,均保持较强的合成尿素及白蛋白能力.结论:150mL/LDMSO浓度适合于乳猪肝细胞的-80℃长期超低温保存,保存时间对其活力无明显影响.冷冻保存;冻存保护剂;二甲基亚砜.
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