【摘 要】
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目的克隆人MAGE-12基因并测序。方法从人肺癌组织中提取mRNA，用RT—PCR从中扩增出MAGE-12基因片段，对其进行PvuⅡ酶切鉴定；将扩增片段克隆于pGEM—Teasy载体中，转化JM109菌；进行蓝
【机 构】
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郑州大学第一附属医院呼吸内科,郑州大学基础医学院微生物与免疫教研室
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目的克隆人MAGE-12基因并测序。方法从人肺癌组织中提取mRNA，用RT—PCR从中扩增出MAGE-12基因片段，对其进行PvuⅡ酶切鉴定；将扩增片段克隆于pGEM—Teasy载体中，转化JM109菌；进行蓝白筛选后，运用pGEM Teasy质粒的TT／SP6作为引物对重组子鉴定，并进行DNA测序。结果PCR扩增得到944bp的基因片段，经PvuⅡ酶切初步证实为MAGE-12基因；阳性克隆经筛选鉴定连接有目的基因；目的基因测序结果与GenBank比较，结果完全相同，表明靶基因成功插入pGEM—Teasy
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