【摘 要】
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本研究旨在克隆绵羊YAP1基因CDS序列,构建并鉴定其真核表达质粒pEGFP-C1-YAP1,及其磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A。本研究利用RT-PCR技术,从湖羊背最长肌克隆YAP1基因编
【机 构】
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扬州大学动物科学与技术学院,保定市中华路小学,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,苏州市畜牧兽医站,徐州市睢宁县林牧渔业局
【基金项目】
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中国博士后科学基金特别资助项目(200902154);科技部家养动物种质资源平台、现代肉羊产业技术体系建设(CARS-39);江苏高校优势学科建设工程资助项目;江苏省农业科技支撑计划项目(BE2012331);江苏省六大人才高峰项目;江苏省工程技术研究中心项目(BM2012308)
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本研究旨在克隆绵羊YAP1基因CDS序列,构建并鉴定其真核表达质粒pEGFP-C1-YAP1,及其磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A。本研究利用RT-PCR技术,从湖羊背最长肌克隆YAP1基因编码区序列,T-A克隆到pMD 19-T载体中,进行测序。利用酶切和T4连接酶连接方法,将YAP1基因编码区克隆到pEGFP-C 1载体中,构建pEGFP-C 1-YAP1真核表达载体,以真核表达载体为模板,构建磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A,2种载体均进行PCR、BamHⅠ和Xh
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