细胞毒性T细胞抗原4胞外结构域的高效表达与纯化

来源 :河南师范大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:angelboy8100
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目的:获得细胞毒性T淋巴细胞相关分子4胞外结构域(exCTLA4)在大肠杆菌中高效表达的条件,并纯化获得高纯度的重组蛋白.方法:构建原核表达质粒pET28a-exCTLA4并转入大肠杆菌Transetta(DE3)中,通过改变诱导物IPTG浓度、细菌培养温度和时间,获得了exCTLA4的最佳表达条件.收集最佳诱导条件下表达exCTLA4的菌体,将菌体超声破碎后,离心分离exCTLA4包涵体,用低浓度尿素(2mol·L^-1)洗去大部分背景蛋白后,再用高浓度尿素(8mol·L^-1)溶解
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