猪白血病抑制因子的真核表达与活性分析

来源 :吉林农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：syhrgl

【摘要】

：

采用分子克隆技术构建猪白血病抑制因子（LIF）的真核表达载体，表达重组猪LIF蛋白并分析其活性。酶切和DNA测序显示，所构建的真核表达质粒pcDNA3．1-pLIF—MycHis含有编码分泌型猪LIF

【作者】

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李明堂付玉王清爽果洪宇李洪广

【机构】

：

长春理工大学生命科技学院,吉林大学中日联谊医院神经外科

【出处】

：

吉林农业大学学报

【发表日期】

：

2008年6期

【关键词】

：

猪白血病抑制因子活性分析胚胎干细胞 LIF activity analysis ES cell

【基金项目】

：

吉林省科技发展计划项目（20010522）,长春市科技计划项目（2006075）

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采用分子克隆技术构建猪白血病抑制因子（LIF）的真核表达载体，表达重组猪LIF蛋白并分析其活性。酶切和DNA测序显示，所构建的真核表达质粒pcDNA3．1-pLIF—MycHis含有编码分泌型猪LIF蛋白的CD—NA序列；免疫印迹分析显示，分泌到上清中的重组蛋白在相对分子质量约37000的位置上有明显的增强表达条带；活性分析结果显示，重组蛋白能够维持小鼠E-14胚胎干细胞在未分化状态。该结果显示重组猪UF蛋白在CHO细胞中进行了正确表达并具有很好的生物活性，能够用来培养小鼠胚胎干细胞，为用于猪胚胎干细胞系

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