【摘 要】
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目的:以人血浆白蛋白(HSA)和IgG为免疫原,制备特异性鸡卵黄抗体IgY(Egg yolk immunoglobulin),并将其固定于金磁微粒表面,用于HSA和IgG的去除研究。方法:用HSA、IgG以及混合
【机 构】
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西北大学生命科学学院,西北大学生命科学学院,西北大学生命科学学院,西北大学生命科学学院,西北大学生命科学学院 国家微检测系统工程研究中心,陕西西安710069,国家微检测系统工程研究中心,陕西西安71
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目的:以人血浆白蛋白(HSA)和IgG为免疫原,制备特异性鸡卵黄抗体IgY(Egg yolk immunoglobulin),并将其固定于金磁微粒表面,用于HSA和IgG的去除研究。方法:用HSA、IgG以及混合成分分别作免疫原免疫Roman母鸡。制备抗HSA和IgG鸡卵黄抗体IgY,并对IgY的分离提取条件进行优化。SDS-PAGE和间接ELISA检测IgY的纯度和效价。将高效价IgY固定于金磁颗粒表面进行血浆高丰度蛋白去除研究。结果:免疫后60~120d内,鸡血清抗体效价可达1∶15000~1∶25000;收获鸡蛋,提取得到的卵黄抗体IgY效价可达1∶10000~1∶25000,纯度98%以上;采用金磁微粒载体固定IgY,可对血浆中的HSA,IgG进行特异性的去除。结论:人血浆中的高丰度蛋白成分HSA和IgG免疫产蛋母鸡后,可从鸡卵黄中分离提取到高效价、高纯度的卵黄抗体IgY;IgY偶联于金磁微粒表面可特异性的去除人血浆中的HSA和IgG,作为血浆蛋白质组学研究的一种新方法,有较好的应用前景。
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