【摘 要】
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目的：构建人源性肺癌噬菌体单链抗体库，为筛选肺癌相关抗原的抗体奠定基础。方法：提取肺癌转移淋巴结总RNA，用RT—PCR技术扩增人抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因，在体外将VH和
【机 构】
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郑州大学公共卫生学院环境卫生学教研室,郑州大学基础医学院组织与胚胎学教研室,郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室
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目的：构建人源性肺癌噬菌体单链抗体库，为筛选肺癌相关抗原的抗体奠定基础。方法：提取肺癌转移淋巴结总RNA，用RT—PCR技术扩增人抗体重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因，在体外将VH和VL连接成单链抗体（ScFv）基因，并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中，电转化至感受态的大肠杆菌TG1，经辅助噬菌体超感染，形成噬菌体单链抗体库，采用限制性内切酶鉴定其多样性。结果：从肺癌转移淋巴结中成功提取RNA，逆转录PCR扩增出入可变区基因，连接形成单链抗体，最终构建了库容为1．2×10^8的抗人
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